[1]吴志平,邓钢,侯居攀,等. 人血栓调节蛋白基因转染兔内皮祖细胞的体外实验研究[J].介入放射学杂志,2013,(09):750-755.
　WU Zhi? ping,DENG Gang,HOU Ju? pan,et al. Transfection of human thrombomodulin gene into endothelial progenitor cells： an in vitro experiment in rabbits[J].journal interventional radiology,2013,(09):750-755.
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 人血栓调节蛋白基因转染兔内皮祖细胞的体外实验研究 ()

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《介入放射学杂志》[ISSN:1008-794X/CN:31-1796/R]

卷:
期数:
2013年09期
页码:
750-755
栏目:
实验研究
出版日期:
2013-09-19

文章信息/Info

Title:
 Transfection of human thrombomodulin gene into endothelial progenitor cells： an in vitro experiment in rabbits
作者:
 吴志平; 邓钢; 侯居攀; 赵国峰; 许荣睿; 文颂; 秦永林; 柏志斌; 滕皋军
Author(s):
 WU Zhi?蛳 ping;  DENG Gang;  HOU Ju?蛳 pan;  ZHAO Guo?蛳 feng;  XU Rong?蛳 rui;  WEN Song;  QIN Yong?蛳 lin;  BAI Zhi?蛳 bin;  TENG Gao?蛳 jun.
 Department of Radiology， Zhongda Hospital， Southeast University， Jiangsu Provincial Key Laboratory of Molecular Imaging and Functional Imaging， Nanjing 210009， China
关键词:
 ; 【关键词】 人血栓调节蛋白;  转染;  内皮祖细胞
文献标志码:
A
摘要:
 【摘要】 目的 探讨人血栓调节蛋白（hTM）基因转染兔内皮祖细胞（EPCs）的可行性及效率，为hTM修饰的EPCs活体移植预防经皮腔内血管成形术术后血管内再狭窄提供实验依据。方法 采用基因工程方法构建重组质粒pcDNA3.1?蛳 hTM。梯度离心法分离兔外周血单个核细胞（MNCs），贴壁筛选出EPCs，通过免疫组化检测其CD34、vWF、KDR 等内皮系抗原，通过Dil?蛳 ac?蛳 LDL及FITC?蛳 UEA?蛳 1荧光染料双吞实验进一步表征EPCs pcDNA3.1?蛳 hTM转染EPCs，转染48 h后行细胞免疫荧光染色，72 h后行Western印迹检测比较重组质粒转染组、空载质粒转染组和对照组hTM表达水平。转染后分别于第3、4、5天采用四氮噻唑蓝法（MTT）比较各组细胞增殖活性。结果 双酶切及基因测序鉴定均证实pcDNA3.1?蛳 hTM重组质粒构建成功；细胞表面抗原及免疫荧光双标实验表明所培养细胞为EPCs。转染后的直接免疫荧光实验及Western印迹检测证实hTM在重组质粒转染组的表达高于对照组；MTT比色实验示重组质粒转染组、空载质粒组、空白对照组在第3、4、5天吸光度值差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 成功构建pcDNA3.1?蛳 hTM重组质粒，转染兔外周血EPCs后可使EPCs成功表达TM，且对EPCs的活力、增殖等生物学性质无明显影响。

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备注/Memo

备注/Memo:
 （收稿日期：２０１3-０2-０1）
更新日期/Last Update: